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土壤蛋白酶活性測(cè)定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-07-22 | 210 次瀏覽 | 分享到:

蛋白酶是對(duì)蛋白質(zhì)的肽鏈進(jìn)行水解的一類酶的總稱,按降解方式的不同,分為內(nèi)肽酶和端肽酶。內(nèi)肽酶是將大分子的多肽鏈從中間給切斷,形成很多的小的肽鏈。端肽酶可以分羧肽酶和氨肽酶,從多肽的游離羧基末端或游離氨基末端逐個(gè)的切除,最終生成氨基酸。



土壤中的蛋白酶分為堿性蛋白酶和酸性蛋白酶,能夠水解各種蛋白質(zhì)和肽類轉(zhuǎn)化為氨基酸,因此,土壤蛋白酶的活性和土壤中氮含量有重要的關(guān)系。



檢測(cè)土壤中的蛋白酶含量,主要的方法就是比色法。這是相對(duì)的簡(jiǎn)單的,如果需要更準(zhǔn)確的方法,也是有的。檢測(cè)原理:土壤蛋白酶在酸性條件下將酪蛋白水解為酪氨酸,絡(luò)氨酸和福林酚在堿性條件下生產(chǎn)藍(lán)色的化合物。這個(gè)藍(lán)色的物質(zhì)能夠在680nm的波長(zhǎng)處具有特別的吸收峰,在檢測(cè)的過程中,需要使用帶有底物酪蛋白作為對(duì)照,以扣除干擾的背景值。


比色法測(cè)定還是需要有標(biāo)準(zhǔn)曲線,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,并測(cè)定對(duì)應(yīng)的吸光度值。對(duì)樣品進(jìn)行處理,測(cè)定吸光度值,求取平均值,并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的酸性蛋白酶含量?,F(xiàn)在,也有專業(yè)的生化檢測(cè)試劑盒,按照說明書操作就可以完成含量測(cè)定。


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