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三氯蔗糖是一種甜味劑,也稱為蔗糖素。易溶于水、甲醇、乙醇、微溶于乙醚。三氯蔗糖具有無能量、高甜度等特點。甜度多高呢,是蔗糖的400~800倍。三氯蔗糖在人體內(nèi)不參與代謝,不會被吸收,熱量也為零,穩(wěn)定性好,可以用在飲料、食品等領域。
檢測樣本中三氯蔗糖的含量,主要方法有高效液相色譜(HPLC)法、液質聯(lián)用(LC-MS)法、紫外-可見分光光度法(UV-Vis)等。
1.高效液相色譜(HPLC)法
HPLC是檢測樣品中化合物含量,比較常用的一種方法了。在檢測三氯蔗糖的過程中,采用了C18的色譜柱,以乙腈-水為流動相,用示差折光檢測器或蒸發(fā)光散射檢測器測定。對于HPLC來說,檢測效果怎么樣,其實和色譜條件是有很大關系的。比如,色譜柱、柱溫、流動相、檢測器、進樣量、流速等可以改變的參數(shù),調(diào)節(jié)它們并優(yōu)化組合,最大程度上測定樣品中的化合物。懂檢測的人,一定要熟悉設備;了解設備的運行特點,才能運用好它,發(fā)揮它的優(yōu)秀性能。檢測過程包括試劑準備、樣品處理、設備調(diào)試,標準品檢測,制作標準曲線,樣品檢測,計算結果等,另外,還要注意重復性,穩(wěn)定性,回收率等問題。
2.液質聯(lián)用(LC-MS)法
LC-MS是可以對物質進行定性和定量分析的,具有較高的靈敏度。它結合了HPLC的分離功能和MS檢測器的高分辨率特點,從分子結構層面上分析。一般采用正離子模式,也是因為正離子模式更適合于分析易產(chǎn)生正離子的樣品或化合物。在正離子模式下,樣品中的分子失去電荷,而生成正離子。正離子模式包括電子轟擊和化學電離等,失去電荷而稱為正離子在電場和磁場的作用下實現(xiàn)分離,通過檢測器讀取數(shù)據(jù)。