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甲酸含量的檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-02-10 | 171 次瀏覽 | 分享到:
甲酸是從自然界中的一些物質(zhì)中提取出來的,比如木材,水果,蜂蜜,蠶絲等。其實,很早的時候是從螞蟻的體內(nèi)提取出來的,也稱為“蟻酸”。后來,發(fā)現(xiàn)越來越多的地方都有甲酸,比如人的皮膚,肌肉,血液和排泄物。甲酸能夠通過天然物質(zhì)提取,也可以靠人工合成。

甲酸是從自然界中的一些物質(zhì)中提取出來的,比如木材,水果,蜂蜜,蠶絲等。其實,很早的時候是從螞蟻的體內(nèi)提取出來的,也稱為“蟻酸”。后來,發(fā)現(xiàn)越來越多的地方都有甲酸,比如人的皮膚,肌肉,血液和排泄物。甲酸能夠通過天然物質(zhì)提取,也可以靠人工合成。



化學式為HCOOH,是最簡單的一種脂肪酸。它無色透明,卻散發(fā)出一種強烈的,富有刺激性的氣味,具有一定的腐蝕性。甲酸看起來是酸,但卻有還原性,可被氧化成二氧化碳和水。當然,和其他的有機物能發(fā)生多種反應。它同時具有醛基和羧基的性質(zhì),可以發(fā)生銀鏡反應,加成反應,酯化反應,還原反應,燃燒反應等。甲酸是一種弱的電解質(zhì),可以作為有機化工原料,比如表面處理劑,橡膠助劑,工業(yè)溶劑等,應用在農(nóng)藥,皮革,染料,醫(yī)藥和橡膠等行業(yè)。


檢測方法,包括氣相色譜(GC)法,高效液相色譜(HPLC)法等。


1.氣相色譜法(GC)


是將甲酸和乙醇進行酯化反應,生成具有揮發(fā)性的甲酸乙酯。這樣,就可以進樣到氣相色譜儀,測定出它的色譜峰,根據(jù)內(nèi)標或外標法,計算出樣品中的甲酸含量。



在氣相色譜儀中,樣品被注入色譜柱,并蒸發(fā)成氣態(tài),通過色譜柱分離,在檢測器中測定出色譜峰,通過標曲,定量分析。一般用氫火焰離子檢測器(FID),選擇適合的色譜柱。參考色譜條件,進樣口溫度140℃,檢測器溫度250℃,設置合適的升溫程序,以氮氣作為載氣。


外標法就是標準曲線,也就是用甲酸標準品,成倍的稀釋成5-7個梯度標準溶液。以上述的色譜條件,測出色譜峰,根據(jù)峰面積和對應濃度的關(guān)系,繪制標準曲線,得到回歸方程。對樣品的色譜峰面積進行積分,并代入回歸方程,計算出樣品中的甲酸含量。


2.高效液相色譜法(HPLC)


精確混勻液體樣品,取出4000r/min離心10分鐘,混勻,過濾膜,待上機檢測。



色譜條件:


C18的色譜柱,250*4.6mm*5μm,柱溫30℃;紫外檢測器,波長210nm;以0.1%磷酸水:甲醇=97.5:2.5為流動相,等度洗脫,流速1ml/min,進樣量10-20ul。


同樣,采用標準曲線的方法來計算樣品中的甲酸含量。


標準點5-7個梯度,在檢測器的有效的范圍內(nèi)。根據(jù)測出來的色譜峰面積,對應的標準品濃度,繪制出標準曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2>0.999。對樣品進行同樣的條件,上機測試。對測出來的色譜峰面積進行積分,結(jié)合回歸方程,是可以計算出甲酸含量的。很多時候,還要有方法學的要求,比如重復性,回收率等。


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