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萹蓄苷主要來源于蓼科植物萹蓄,當(dāng)然其他植物也能有發(fā)現(xiàn)。萹蓄對(duì)生長的地方?jīng)]有特別要求,在田間地頭,路旁,溝渠等都能活。過去,它是一味很好的中藥材,具有抗炎、抗氧化、抗過敏等作用,在利尿、鎮(zhèn)咳、祛痰方面也表現(xiàn)出色。《神農(nóng)本草經(jīng)》、《綱目》等都對(duì)萹蓄的相關(guān)記載。萹蓄苷屬于黃酮類化合物,化學(xué)式為C20H18O11,分子量434.35,可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑,不溶于石油醚、氯仿等溶劑。
測(cè)定樣品中的萹蓄苷含量,一般用到高效液相色譜(HPLC)法。
前面我們說過,它能夠溶于甲醇等有機(jī)溶劑。因此,我們?cè)谔崛〉倪^程中,就需要用到對(duì)應(yīng)的有機(jī)溶劑,將樣品中的萹蓄苷盡可能的提取出來。比如,將萹蓄干燥,粉碎,過40-80目篩,使用超聲,離心,過濾,待測(cè)。
色譜條件:C18色譜柱,柱溫室溫;流動(dòng)相為0.1%甲酸-乙腈或甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脫,1.0ml/min;紫外檢測(cè)器,350nm;進(jìn)樣量10-20ul,僅供參考。需要對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證,或重新開發(fā)。色譜條件的選擇,是需要對(duì)目標(biāo)化合物有足夠的了解,同時(shí)兼顧到HPLC的運(yùn)行過程可能產(chǎn)生的影響,從而獲得相對(duì)準(zhǔn)確的,有效的方法。
實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),一般用外標(biāo)法,也就是使用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量。選擇標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行成倍的、梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn)。這個(gè)點(diǎn)要在檢測(cè)器的有效的范圍內(nèi),或具有更為優(yōu)良的線性。樣品的測(cè)定,也是和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相同的色譜條件,根據(jù)出來的色譜峰面積,積分。標(biāo)準(zhǔn)曲線是繪制出來的,有相關(guān)的回歸方程,相關(guān)系數(shù)要r2>0.999,這樣才能獲得相對(duì)可靠的計(jì)算結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)曲線,就像一把尺子,用它去丈量樣品測(cè)出來的色譜峰面積,計(jì)算出樣品中的萹蓄苷含量。