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cAMP是3,5-環(huán)腺苷酸，是一種有機物，是細胞內(nèi)的第二信使。也就是二傳，當?shù)谝恍攀辜せ盍讼佘账岘h(huán)化酶，就催化ATP環(huán)化形成。因此，它的信號能不能傳遞，是否繼續(xù)，是要依賴于蛋白激酶A的。當然，cAMP在有的微生物中，也參與了轉(zhuǎn)錄調(diào)控的作用。它的作用，主要是調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的物質(zhì)代謝和生物學功能，在臨床方面也有一定的研究。從病理學角度來看，cAMP和一些疾病的產(chǎn)生，傳導了有效的信號。

檢測cAMP的方法有很多，其中包括了高效液相色譜（HPLC）法，酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法。

1.高效液相色譜（HPLC）法

HPLC測定cAMP含量，需要經(jīng)過前處理，色譜條件，樣品測定，標準曲線，含量計算等步驟。利用樣品中化合物在固定相和流動相之間的分配系數(shù)差異，進行分離和測定。

色譜條件：C18的色譜柱，柱溫30℃；流動相：A相為磷酸鹽緩沖液，B相為乙腈，洗脫方式需要根據(jù)實驗來定，流速1.0ml/min；紫外檢測器，波長258nm；進樣量10-20uL，僅供參考。一般情況下，要對方法進行驗證。

標準曲線：對標準品進行溶解，梯度稀釋至少5-7個點，最低點要是檢測限的5倍左右。上機測定，出現(xiàn)色譜峰。以標準溶液的濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程，要r2＞0.999，以確保線性。重復性和回收率也是需要考慮的。

樣品測定：樣品的測定，和標準品的操作是相似的。如果怕標準品污染，可以先測樣品。根據(jù)測定出來的色譜峰，對面積進行積分，根據(jù)回歸方程，計算出含量。

2、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

往預先包被環(huán)磷酸腺苷（cAMP）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環(huán)磷酸腺苷（cAMP）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。