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組氨酸(全名:L-組氨酸,簡(jiǎn)稱His)是一種人體必需的堿性氨基酸,是一種極性的α-氨基酸,化學(xué)式為C6H9N3O2,分子量155.15。它的主要作用是維持身體各個(gè)組織的健康發(fā)展,特別是神經(jīng)細(xì)胞的髓鞘,確保將大腦的信息傳遞給身體的各個(gè)部位。
組氨酸的合成路線比較復(fù)雜,一般靠從外在食物中攝取。組氨酸的咪唑基能和亞鐵離子等形成配位化合物,促進(jìn)對(duì)鐵的吸收。在組氨酸脫羧酶的作用下,組氨酸脫羧而形成組胺,有擴(kuò)張血管的作用。另外,組氨酸在代謝過(guò)程中起著重要的作用。
通過(guò)柱前衍生高效液相色譜(HPLC)法,可以有效地分離和測(cè)定游離的組氨酸含量。檢測(cè)步驟包括樣品:制備-色譜條件設(shè)置:C18色譜柱、流動(dòng)相乙腈和水(梯度洗脫)、流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)波長(zhǎng)等-樣品進(jìn)樣-色譜分離-檢測(cè)-色譜峰數(shù)據(jù)處理和結(jié)果分析。在檢測(cè)的時(shí)候,需要有標(biāo)準(zhǔn)品(梯度稀釋6個(gè)點(diǎn))測(cè)定,用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果怕污染管路,可以先測(cè)定樣品,然后外標(biāo)法測(cè)組氨酸標(biāo)準(zhǔn)品。最后,一定不能忘記計(jì)算回收率。也就是說(shuō),在制作標(biāo)準(zhǔn)品的時(shí)候標(biāo)記的濃度或含量。在通過(guò)HPLC檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果,是有一定的偏差存在的。需要將這個(gè)偏差給計(jì)算出來(lái),并還原到樣品檢測(cè)的數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果中。
除了HPLC法,還有點(diǎn)位滴定法、氣相色譜(GC)法、分光光度法等。根據(jù)具體的需求,選擇對(duì)應(yīng)的方法。在準(zhǔn)確的基礎(chǔ)上,選擇經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的檢測(cè)方法。比如通過(guò)點(diǎn)位滴定法測(cè)組氨酸的含量,包括精確稱量、加入無(wú)水甲酸和冰醋酸滴定液滴定,通過(guò)記錄滴定數(shù)據(jù)來(lái)計(jì)算組氨酸的含量。