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丁酸是直鏈飽和脂肪酸，也是短鏈脂肪酸，化學(xué)式為CH3(CH2)2COOH，分子量:88.11，能夠溶于水、乙醇和乙醚等。天然的丁酸存在與香茅、肉豆蔻、奶油等中，可以做食用香料、水果香精，也可以作為萃取劑，用于制備丁酸脂類化合物。丁酸可以發(fā)生脫水、酯化、α-H、脫羧等反應(yīng)。在動(dòng)物脂肪和植物油中以丁酸酯形式存在，在工業(yè)上用蔗糖或淀粉發(fā)酵的形式來(lái)獲取丁酸。

檢測(cè)樣本中的丁酸含量，方法還是比較多的。通常情況下，采用的是高效液相色譜（HPLC）法、氣相色譜（GC）法、液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法、氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）法、比色法等。方法雖多，但道理是一樣的。這里我們簡(jiǎn)單的介紹一下，根據(jù)需求來(lái)選擇對(duì)應(yīng)的方法。

1.高效液相色譜（HPLC）法

從樣本溶液中將丁酸分離出來(lái)，這主要靠色譜柱和流動(dòng)相。選擇適當(dāng)?shù)纳V柱，可以讓混合物中的丁酸和其他物質(zhì)分離開(kāi)來(lái)，這里用一般的C18色譜柱。流動(dòng)相的話，就是將色譜柱上的丁酸，沖洗出來(lái)并進(jìn)入檢測(cè)器獲取對(duì)應(yīng)的信號(hào)，從而轉(zhuǎn)化成有效的圖譜和數(shù)據(jù)。因此，流動(dòng)相就要盡可能的將丁酸洗脫出來(lái)，這里用的是甲醇-水混合溶劑。在色譜條件設(shè)置的時(shí)候，還有很多其他因素和參數(shù)影響到檢測(cè)結(jié)果，比如柱溫、進(jìn)樣量、流速、檢測(cè)器等。

選擇最佳的色譜條件，其實(shí)并不是容易得事情。如果有現(xiàn)成的方法或標(biāo)準(zhǔn)，那就直接操作就行了。如果要對(duì)方法開(kāi)發(fā)，那就要最優(yōu)化設(shè)計(jì)，從而確保能夠最大程度上檢測(cè)出結(jié)果。說(shuō)來(lái)話長(zhǎng)了，這里先說(shuō)檢測(cè)步驟吧。樣品的準(zhǔn)備是不可忽略的，如果樣品處理不恰當(dāng)，結(jié)果會(huì)出現(xiàn)較大的偏差的。因此，這個(gè)前期處理是需要認(rèn)真核對(duì)，去除雜質(zhì)，粉碎成末，并加入適當(dāng)?shù)娜軇┹腿?。接著要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)現(xiàn)梯度稀釋，并進(jìn)樣到色譜系統(tǒng)，測(cè)定它們的峰面積并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。接著，將待測(cè)樣品注入到液相色譜，測(cè)定色譜峰高和峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中丁酸含量。需要測(cè)重復(fù)性，穩(wěn)定性，回收率等。也可以先測(cè)樣品，再測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品，避免出現(xiàn)色譜柱被標(biāo)準(zhǔn)品污染的情況。

2.氣相色譜（GC）法

氣相色譜是利用惰性氣體為流動(dòng)相，以色譜柱來(lái)分離混合物中的丁酸，通過(guò)檢測(cè)器來(lái)獲取信號(hào)并讀取數(shù)據(jù)。就是通過(guò)加熱的方法，將溫度升高到丁酸的沸點(diǎn)左右，跟著氣體一起進(jìn)入到檢測(cè)器。樣本的準(zhǔn)備，和HPLC是相似的。色譜柱和條件的選擇是不同的，色譜柱是用毛細(xì)管色譜柱，以氮?dú)鉃檩d氣，流速為1.0mL/min。準(zhǔn)備不同濃度的丁酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，并進(jìn)樣檢測(cè)，根據(jù)色譜檢測(cè)數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，記錄色譜圖和數(shù)據(jù)，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中含有的丁酸含量。

此外，還有LC-MS和GC-MS檢測(cè)法，這兩種方法搭載了高靈敏度的質(zhì)譜檢測(cè)器，更深入、更準(zhǔn)確對(duì)丁酸進(jìn)行定性和定量分析。不過(guò)，檢測(cè)精度越高，成本也相應(yīng)增加了。隨著科技的發(fā)展，也可以采用試劑盒的方法測(cè)定。