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次黃嘌呤核苷酸（IMP）是生物體內的一種嘌呤核苷酸，是由次黃嘌呤、核糖和磷酸基團組成的。在體內起著重要的作用，如核酸合成、能量傳遞、細胞信號調控等。次黃嘌呤核苷酸（IMP）是腺嘌呤核苷酸（AMP）和鳥嘌呤核苷酸（GMP）的共同前體，IMP是經過磷酸戊糖途徑和多步的酶促反應而合成的，可被水解為次黃苷和磷酸，進一步分解為尿酸排出體外。

檢測方法：高效液相色譜（HPLC）或液相色譜串聯(lián)質譜（LC-MS/MS）。

1.樣品處理

精確稱取0.2000g樣品，放入2mL 離心管，再加 1mL 2.5%高氯酸水溶液，放置振蕩器混勻 1min，低溫超聲20min，13000r/min 離心 20min，取上清液過 0.45μm濾膜，待液相色譜測定。

2.色譜條件

C18色譜柱，250mm長，4.6mm內徑，5um粒徑，柱溫30℃；以甲醇-水（2:98）為流動相，等度洗脫，流速1ml/min。紫外檢測器，波長254nm。進樣量10uL。有的用的色譜柱不一樣，對應的流動相也會有所差別。比如，用ODS-100V（250*4.6mm，5μm）的色譜柱，0.035mol/L 磷酸二氫鈉（pH=6.8）等度洗脫。

3.標準曲線

將次黃嘌呤核苷酸（IMP）的標準品用甲醇溶解，配制成標準母液。并進行一系列的梯度稀釋，比如0.5mg/L，1.5mg/L，10mg/L，50mg/L，100mg/L，盡可能的覆蓋到樣品溶液的濃度范圍。進樣到HPLC中，測出色譜峰，記錄峰的保留時間，對峰面積進行積分。在表格中用趨勢圖可擬合出標準曲線，得到回歸方程，相關系數(shù)r2要大于0.999并接近于1。有的需要加標回收率，穩(wěn)定性等考慮。

4.含量計算

有了標準曲線，通過測定樣品溶液的色譜峰，保留時間能識別出色譜峰，并對面積進行積分，代入到回歸方程，可計算出樣品溶液中的IMP的含量。